可见分光光度法测定吸光度时有哪些干扰因素

2025-03-23 05:23:11

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回答1：

1.仪器是否工作正常（光源灯老化，电压不稳定，集成电路板、显示器有毛病，波长调节器有毛病等等）
2.标准溶液浓度是否准确
3.所用方法是否合理（你选用的标准方法是否符合你要测定的对象——被测定浓度范围，干扰情况，赋存状态等等）
4.所用试剂是否符合要求（纯度、干扰情况）
5.所用量器（天平、容量瓶、移液管等）是否存在系统误差
6.配置显色过程是否误操作（加入试剂顺序、加入量等）
7.显色时间、显色温度是否符合要求
8.样品槽是否洁净
9.测试吸光度范围是否在0.2--0.8之间

回答2：

实际上分光光度计的概念叫大，分光光度计还有紫外分光光度计，红外分光光度计等等。其主要是根据能量跃迁原理来区分。
例如紫外分光光度计是测量物质经过紫外激发后物质可以吸收紫外光多少，测量的值是通过物质的光，检测信号与发射信号在一条直线上。
而荧光分光光度计是给与一个激发波长后，到达激发态，再发射光，所以检测的是物质发射的光，检测信号与发射器不在一条线上。
例如蛋白质，因为里面有酪氨酸、色氨酸的发色基团，一般的联苯结构，也就是可以形成ππ共轭体系的物质都可发射荧光。如果物质自身不带有荧光，则可以加入荧光探针。