如何进行灵芝菌种的组织分离？

灵芝菌种的组织分离法：是利用灵芝的子实体在适宜的条件下能生长出菌丝的特性，来分离获得纯菌种的方法。操作简便，取材方便，在野外采种或室内分离纯菌种时都可采用此法。组织分离是一种无性繁殖，菌丝的细胞是双核细胞，双核菌丝中的两个核还未进行核配，即双亲染色体并没有发生重组，所分离获得的菌种是该灵芝的营养世代，容易产生变异。在适宜的营养和培养条件下，选择典型的菌落进行培养，菌株则可保持其原菌种的优良品质，否则，其性状往往会发生变异。

（1）分离材料的选择与消毒

在野外采集野生灵芝时，应根据采集的目的要求选择优良的个体进行分离。分离人工栽培的品种时，则应从优良品系中选择优良的单株作材料。

灵芝组织分离时先应将分离材料用清水冲洗干净，去掉泥沙或污物，用纱布擦干水分，即可移到无菌室进行分离前的消毒处理。通常，灵芝子实体可在0.1%的升汞液中浸泡1～2分钟，或用75%的酒精表面擦拭消毒。

（2）分离方法

将要分离的子实体放入无菌室内，用无菌水冲洗数次，进行表面消毒，随即用消毒过的解剖刀从菇柄中部纵切一刀，撕开，挑取菌盖和菇柄交界处的一小块组织，移接到PDA斜面培养基上，加上棉塞，于25℃下培养，即可得到该菌的菌种。