首先，氢氧化铜是一种弱碱，在鉴定蛋白质时，需要碱性坏境，所以硫酸铜不能多，多了就会降低体系的pH，导致反应结果出现偏差。而鉴定还原糖（本质是鉴定醛基），需要的是弱氧化剂氢氧化铜与还原性的醛基反应，生成砖红色的氧化亚铜沉淀，通过化学我们知道，碱性过强，会使羟基的氢被多去，从而变成羟基氧负离子，由于羟基氧负离子对金属离子具有很强的配位性，会使铜离子被配位，从而得不到氢氧化铜，这时我们就需要用硫酸铜将强碱性的氢氧化钠变为弱碱性的氢氧化铜。再者，我们也可以从显色会不会受到氢氧化铜、硫酸铜颜色的干扰这一方面来理解。
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