什么是孢子分离法？怎样进行？

所谓的孢子分离法是把成熟的有性孢子接种在同一培养基上，让其萌发、自由交配来获得纯菌种的方法。孢子分离法因所利用孢子的数目不同，又分为多孢子分离和单孢子分离两种。一般来说，多孢子分离所获得的纯种基本上能形成子实体，且方法易学，分离较易成功，在生产上经常采用，不过应作出菇实验后才能用于生产。单孢子分离一般用于培育优良新品种，且操作比较复杂，必须要有熟练的技术和设备方可进行。因此，在制种时一般采用多孢分离法，其操作方法如下：
（1）种菇挑选种菇即分离材料，对种菇进行挑选是菌种分离中的重要环节，必须从高产、稳产、适应性强的优良品系群中，严格挑选出菇形、商品性好，外表清洁、无病虫害七八分成熟的子实体做种菇。采摘后放入灭过菌的纸袋内，带回接种室。（2）器皿消毒首先应将所用的分离器皿（烧杯、玻璃罩或三角瓶、培养皿、剪刀、接种针、镊子、解剖刀、不锈钢钩、纱布）一起置于高压灭菌锅内进行消毒灭菌，并准备好无菌水。然后连同酒精灯、消毒药品、制作备好的三角瓶或试管培养基和分离器皿，以及经处理的种菇等，放入接种箱（室）内。用紫外线灯照射45分钟或用气雾消毒剂熏蒸30分钟或同接种箱使用灭菌，才可按无菌操作进行分离。（3）无菌处理在接种箱（室）内，用镊子夹住种菇，放入70%酒精液或0.1%升汞溶液内浸3～5分钟，以杀死种菇表层的杂菌。捞取后用无菌纱布吸干，置于消毒后的培养皿中备用。（4）孢子采集将经无菌处理的种菇切取一部分或不切取，用不锈钢钩钩住，挂入三角瓶的正中，距离培养基表面2～3厘米，并塞好棉塞，静置24小时。之后会发现有大量的孢子弹落于培养基上，形成一层孢子印。（5）接种培养在接种箱内，用接种针挑取少量的孢子，放入装无菌水的三角瓶中，摇动制成孢子悬浮液。再用接种针蘸取一滴孢子悬浮液，涂布于斜面培养基或在培养皿的平板上画线接种。然后适温培养，待孢子萌发成菌落时，筛选萌发早、生长快的菌丝进行转管培养。当白色菌丝长满整个试管培养基斜面，即得原始母种。