你的阴性对照就是无任何染色的细胞。 PI阳性对照，可以固定过的死细胞，可以保证都是PI阳性 Annexin阳性的细胞，用trypsin消化时间长一点（比如消化10分钟），大部分也是阳性的。这个也从一个侧面反映出该方法（Annexin V+PI）的非特异性很高。 上机先用阴性对照设置PMT的电压和gate。再用PI和Annexin单染的阳性细胞调节compensation。然后就可以检测双染的样本了。
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