血红蛋白属于哪类蛋白质它的吸收光谱反映它的什么结构成分

2025-03-25 03:59:55

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回答1：

血红蛋白属于运输蛋白质，负责运载氧的一种蛋白质。
血红蛋白是高等生物体内负责运载氧的一种蛋白质。也是红细胞中唯一一种非膜蛋白。人体内的血红蛋白由四个亚基构成，分别为两个α亚基和两个β亚基，在与人体环境相似的电解质溶液中血红蛋白的四个亚基可以自动组装成α2β2的形态。血红蛋白的每个亚基由一条肽链和一个血红素分子构成，肽链在生理条件下会盘绕折叠成球形，把血红素分子抱在里面，这条肽链盘绕成的球形结构又被称为珠蛋白。血红素分子是一个具有卟啉结构的小分子，在卟啉分子中心，由卟啉中四个吡咯环上的氮原子与一个亚铁离子配位结合，珠蛋白肽链中第8位的一个组氨酸残基中的吲哚侧链上的氮原子从卟啉分子平面的上方与亚铁离子配位结合，当血红蛋白不与氧结合的时候，有一个水分子从卟啉环下方与亚铁离子配位结合，而当血红蛋白载氧的时候，就由氧分子顶替水的位置。
血红蛋白是脊椎动物红血细胞的一种含铁的复合变构蛋白，由血红素和珠蛋白结合而成。其功能是运输氧和二氧化碳，维持血液酸碱平衡。也存在于某些低等动物和豆科植物根瘤中。分子量约67 000，含有四条多肽链，每个多肽链含有一个血红素基团，血红素中铁为二价，与氧结合时，其化学价不变，形成氧合血红蛋白。呈鲜红色，与氧解离后带有淡蓝色。有多种类型：血红蛋白A(HbA)，α2β2，占成人血红蛋白的98%；血红蛋白A2(HbA2)，α2δ2，占成人血红蛋白的2%；血红蛋白F(HbF)，α2γ2，仅存在于胎儿血中；血红蛋白H(HbH)，β4，四个相同β链组成的四聚体血红蛋白；血红蛋白C(HbC)，β链中Lys被Glu取代的血红蛋白；血红蛋白S(HbS)，镰刀状细胞红蛋白；血红蛋白O2(HbO2，HHbO2)，氧合血红蛋白；血红蛋白CO(HbCO)，一氧化碳结合血红蛋白。在没有氧存在的情况下，四个亚基之间相互作用的力很强。氧分子越多与血红蛋白结合力越强。中心离子铁(II)进一步和蛋白质链中的组氨酸结合，成为五配位。既是配位中心，又是活性中心。血红蛋白中铁(II)能可逆地结合氧分子，取决于氧分压。它能从氧分压较高的肺泡中摄取氧，并随着血液循环把氧气释放到氧分压较低的组织中去，从而起到输氧作用。一氧化碳与血红蛋白的结合较氧强，即使浓度很低也能优先和血红蛋白结合，致使通往组织的氧气流中断，造成一氧化碳中毒（使氧气与血红蛋白的结合能力下降，使人窒息而死亡）。

回答2：

实验二血红蛋白及其衍生物的吸收光谱测定目的要求掌握722型分光光度计的使用型分光光度计的使用掌握了解血红蛋白及其衍生物的吸收光谱的测定掌握血红蛋白标准曲线的绘制实验原理分光光度计的使用溶液中的物质在光的照射激发下，产溶液中的物质在光的照射激发下，生了对光吸收的效应，生了对光吸收的效应，物质对光的吸收是具有选择性的，具有选择性的，各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱，各自的吸收光谱，因此当某单色光通过溶液时，其能量就会被吸收而减弱，液时，其能量就会被吸收而减弱，光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关也即符合于比色原理---朗伯朗伯-比耳定律系，也即符合于比色原理朗伯比耳定律朗伯比尔定律：朗伯比尔定律： A=εlc A：物质的吸光度 ε：摩尔吸光系数 l：液层的厚度 c：溶液的浓度比色皿的使用 ? 手持毛玻璃面，不可触碰光滑面手持毛玻璃面， ? 使用前要再用少量（大约1-2ml）待测溶液使用前要再用少量（大约）润洗1次润洗1次 ? 使用时比色皿光滑面对准光路 ? 使用后及时清洗（用海绵刷沾取肥皂液清使用后及时清洗（洗比色皿，并用自来水冲洗干净，洗比色皿，并用自来水冲洗干净，随后用蒸馏水润洗1-2次蒸馏水润洗次）血红蛋白及其衍生物的吸收光谱测定血红蛋白(Hb)与O2结合生成氧合血红蛋白与结合生成氧合血红蛋白血红蛋白 (HbO2)，与CO结合生成碳氧血红蛋白结合生成碳氧血红蛋白，结合生成碳氧血红蛋白(HbCO)。。因其血红蛋白分子结构不同，当光线分别透因其血红蛋白分子结构不同，过各种Hb溶液时，所吸收的光波也各异，过各种溶液时，所吸收的光波也各异，可显溶液时出特有的吸收光谱。出特有的吸收光谱。这些吸收光谱可作为它们定性和定量分析的基础。性和定量分析的基础。在可见光波长400~600nm范围如HbO2在可见光波长范围内有3个特征的吸收峰，其峰值分别在内有个特征的吸收峰，其峰值分别在415、个特征的吸收峰、 541和576nm处，当氧合血红蛋白转为碳氧和处血红蛋白（HbCO），此时光谱发生改变，），此时光谱发生改变血红蛋白（），此时光谱发生改变，在波长419、540和569nm处出现三个特征、在波长和处出现三个特征的吸收峰，其中在范围内2个的吸收峰，其中在500~600nm范围内个范围内特征的吸收峰如下图。特征的吸收峰如下图。项目 HbO2 HbCO 吸收峰数 2 2 吸收光谱（）吸收光谱（nm） 541 577 540 569 本实验先制备Hb及其衍生物，本实验先制备及其衍生物，然及其衍生物后在不同波长下测其光吸收度，后在不同波长下测其光吸收度，以吸光度（）又称光密度）为纵坐标，光度（A）（又称光密度）为纵坐标，波长为横坐标绘制成吸收光谱曲线，波长为横坐标绘制成吸收光谱曲线，由此可以确定它们最大的吸收波长。由此可以确定它们最大的吸收波长仪器和试剂 1．仪器：试管；吸量管；量筒；722型分．仪器：试管；吸量管；量筒；型分光光度计；发生器发生器。光光度计；CO发生器。 2．试剂：．试剂：（1）浓H2SO4；）（2）甲酸；）甲酸；（3）蒸馏水；）蒸馏水；（4）血红蛋白溶液。）血红蛋白溶液。（5）NaOH；）；实验操作预热仪器选定波长调节“ 点调节“0”点调节T=100％调节T=100％ T=100 测定关机分光光度计的使用 1．样品的制备：．样品的制备：用草酸钾抗凝，取静脉血，边取边轻轻摇动，用草酸钾抗凝，取静脉血，边取边轻轻摇动，即制得全血。即制得全血。（1）氧合血红蛋白（HbO2）液：）氧合血红蛋白（加蒸馏水20ml，取全血，取全血0.1ml（3滴）盛于加蒸馏水（滴小烧杯中，混匀，此即HbO2液，呈鲜红色。呈鲜红色。小烧杯中，混匀，此即（2）碳氧血红蛋白（HbCO) 液：）碳氧血红蛋白（取上述HbO2液约液约5ml于试管中，通CO气体于试管中，取上述于试管中气体浓硫酸与甲酸在CO发生器中反应发生）约10 发生器中反应发生）（浓硫酸与甲酸在发生器中反应发生即变成樱桃红色的溶液。秒钟，HbO2即变成樱桃红色的HbCO溶液。秒钟，溶液 2．吸光度测定：．吸光度测定：（1）将如上制备的种血红蛋白液分别）将如上制备的2种血红蛋白液分别盛于比色杯内，盛于比色杯内，在722型分光光度计上以蒸型分光光度计上以蒸馏水为空白调节吸光度零点和100%（每一馏水为空白调节吸光度零点和（次读数均应用空白管调节零点和100%）。次读数均应用空白管调节零点和）。（2）先从波长）先从波长500~600nm分别测定分别测定 HbO2，碳氧血红蛋白的吸光度（在相应峰碳氧血红蛋白的吸光度（值的10nm范围内每隔值的范围内每隔2nm记录一次吸光度记录一次吸光度范围内每隔读数，其余均每隔10nm记录一次吸光度读读数，其余均每隔记录一次吸光度读数）。 3.吸收光谱曲线的绘制吸收光谱曲线的绘制以吸光度为纵坐标，以吸光度为纵坐标，波长为横坐标描并将各点连接成曲线，点，并将各点连接成曲线，即为血红蛋白及其衍生物的吸收光谱，但由于使用仪器及其衍生物的吸收光谱，不同，不同，绘制出的血红蛋白及其衍生物的吸收光谱必有一些差异，对722型分光光度计收光谱必有一些差异，型分光光度计来说，峰值误差在± 来说，峰值误差在±3nm~5nm波长内是允波长内是允许的。许的。注意事项分光光度计应放在干燥处，使用温度为5 35℃ 35℃。分光光度计应放在干燥处，使用温度为5~35℃。远离强电场、离强电场、磁场为了防止光电管疲劳。为了防止光电管疲劳。不测定时必须将比色皿暗箱盖打开，使光路切断，暗箱盖打开，使光路切断，以延长光电管使用寿命每次做完实验时，每次做完实验时，应立即洗净比色皿当仪器停止工作时，切断电源，当仪器停止工作时，切断电源，电源开关同时切断。并且用套子盖住仪器，切断。并且用套子盖住仪器，做好使用登记思考题 ? 1、什么叫吸收光谱？测定血红蛋白及其衍、什么叫吸收光谱？生物的吸收光谱有何意义？生物的吸收光谱有何意义？ ? 2、Hb属于哪类蛋白质，它的吸收光谱的特属于哪类蛋白质，、属于哪类蛋白质征反映它的什么结构成分？征反映它的什么结构成分？

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