Muscle inhibitors肌肉抑制剂(Myostatin,MSTN)特异性表达于肌肉组织,上海雅曦(国际)斯>诺>美>授>权>生>物>医>学>技>术>服>务>中心营销A11部属于TGF-β超家族,是调控肌肉生长和发育的最重要的负调控因子,并同多种疾病有关。为获得MSTN蛋白,制备多克隆抗体,深入了解MSTN基因的调控机理,将MSTN基因片段克隆入组氨酸标签融合的表达载体pET-30a-c(+)中,IPTG诱导,利用金属螯合亲和层析(MCAC)进行纯化,薄层扫描及Bradford法检测纯化蛋白的纯度与含量;免疫家兔制备多克隆抗体,利用间接ELISA法检测抗体效价,Western blotting印迹检测抗体特异性。经表达形式分析证明,融合蛋白大部分为包涵体,薄层扫描分析表明纯化蛋白纯度可达90%以上,Bradford法检测蛋白浓度约5㎎/ml。抗血清效价可达1:250000以上,Westernblotting印迹检测证明抗体特异性良好。结论:经诱导表达及纯化制备出纯度较高的MSTN蛋白产物,并获得高效价特异性良好的多克隆抗体。
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